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DNA Capture Beads(MB101)

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¥ 699.00
DNA Capture Beads
可以替代AMPure XP Beads
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产品说明

DNA Capture Beads是一种基于SPRI(Solid Phase Reverse Immobilization)原理的磁珠产品,能够用于DNA纯化、DNA 片段筛选等实验,具有操作流程简单、回收率高的特点。

 

产品组分

组分 MB101S MB101M MB101L
DNA Capture Beads 5 mL*1 50 mL*1

500 mL*1

储存条件

4~8 ℃保存。

 

实验流程

DNA纯化
1. 提前30 min将磁珠从4℃冰箱取出,静置使其温度平衡至室温;
2. 上下快速晃动将磁珠充分摇匀(不推荐涡旋振荡混匀);
3. 参考下表,根据回收DNA片段大小吸取一定体积磁珠悬液加入到DNA样品中,移液器轻轻吹打8~10次使样品和磁珠充分混匀;

目标片段大小 磁珠用量体积 : 样品体积
≥100 bp 2.0 × ~ 3.0 ×
≥200 bp 1.5 ×
≥300 bp 1.2 ×
≥400 bp 1.0 ×
≥1 kb 0.5 ×

4. 室温静置3~5min,使DNA充分结合到磁珠表面;
5. 将样品置于磁力架上,待溶液澄清后(约2-3 min),小心移除上清;
6. 保持样品置于磁力架上,如果样品置于PCR反应管,每管加入200μL 75%乙醇,如果样品置于1.5 mL EP管,每管加入1 mL 75%乙醇,室温孵育30s后弃去上清;
7. 重复“步骤6.”清洗DNA,第二次清洗后,尽量把液体吸干净,最后少许液体可以使用量程为10 μL的移液器吸取丢弃;
8. 保持样品置于磁力架上,将样品置于操净工作台通风干燥2 min,或室温静置干燥5~8min,不能干燥太久;
9. 从磁力架取下样品,加入适量的TE或无菌ddH2O洗脱DNA,移液器吹打混匀或涡旋振荡混匀,室温静置2-5 min;

10. 将样品置于磁力架上,待溶液澄清后(约1-3 min),小心吸取上清至一个新的EP管中。
 

DNA片段分选
1. 提前30 min将磁珠从4℃冰箱取出,静置使其温度平衡至室温;
2. 上下快速晃动将磁珠充分摇匀(不推荐涡旋振荡混匀);
3. 根据DNA片段分选要求,参考下表,吸取适量磁珠悬液(第一次分选)加入到DNA样品中,移液器轻轻吹打8~10次使样品和磁珠充分混匀;

片段分选范围/bp 150~350 200~350 200~500 300~500 300~550 300~700
第一次分选体积比Beads : DNA 0.63 0.63 0.55 0.55 0.52 0.45
第二次分选体积比Beads : DNA 0.38 0.18 0.25 0.15 0.18

0.2

4. 室温静置8~10 min,使DNA充分结合到磁珠表面;
5. 将样品置于磁力架上,待溶液澄清后(约3~5 min),小心吸取上清至一个新的EP管中;
6. 根据DNA片段分选要求,向吸取的上清中加入适量的磁珠悬液(第二次分选),移液器轻轻吹打8~10次使样品和磁珠充分混匀;
7. 室温静置8~10 min,使DNA充分结合到磁珠表面。
8. 将样品置于磁力架上,待溶液澄清后(约3~5 min),小心移除上清;
9. 保持样品置于磁力架上,如果样品置于PCR反应管,每管加入200μL 75%乙醇(推荐现用现配),如果样品置于1.5 mL EP管,每管加入1 mL 75%乙醇,室温孵育30s后弃去上清;
10. 重复“步骤9.”清洗DNA,第二次清洗后,尽量把液体吸干净,最后少许液体可以使用量程为10 μL的移液器吸取丢弃;
11. 保持样品置于磁力架上,将样品置于操净工作台通风干燥2 min,或室温静置干燥5~8min,不能干燥太久;
12. 从磁力架取下样品,加入适量的TE或无菌ddH2O洗脱DNA,移液器吹打混匀或涡旋振荡混匀,室温静置2~5 min;
13. 将样品置于磁力架上,待溶液澄清后(约1-3 min),小心吸取上清至一个新的EP管中;
14. (Optional)电泳检测片段筛选效果;

 

FAQs

Q1:将磁珠放到-20℃冰箱,但磁珠未结冰,磁珠能否继续使用?
A1:不建议使用。因为低温会破坏磁珠的结构,使得磁珠的吸附DNA效率降低,推荐重新购买磁珠。

 

Q2:磁珠片段分选的原理是什么?
A2:DNA大片段更易吸附到磁珠上,第一次分选,磁珠会结合较大的DNA,通过弃磁珠去除这部分DNA大片段,第二次分选,磁珠会结合溶液中剩余DNA中的较大片段,通过弃上清去除较小的DNA。

 

说明书 

DNA Capture Beads_manual.pdf (点击下载)

 

¥1000.00