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AarI_R762

AarI 限制酶, # R762

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¥ 676.00
识别序列:
5'...CACCTGC(N)4↓...3'
3'...GTGGACG(N)8↑...5'
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产品说明

AarⅠ
识别序列:
5'...CACCTGC(N)4↓...3'
3'...GTGGACG(N)8↑...5'

 

产品组分

组分 R762S R762M R762L
AarI (2 U/μL) 50 μL*1 100 μL*1  500 μL*1 
10X AgileCut® Buffer 1.25 mL*1 1.25 mL*1 1.25 mL*2
AarI Enhancer 60 μL*1 120 μL*1 600 μL*1 
10X DNA Loading Buffer 1.25 mL*1 1.25 mL*1 1.25 mL*2

 

储存条件

-20℃保存。

 

推荐反应体系

试剂 质粒DNA PCR产物 基因组DNA
ddH2O, nuclease-free (#P411) 14.6 μL 15.4 μL 29 μL
10× AgileCut® Buffer 2 μL 3 μL* 5 μL
AarⅠ Enhancer 0.4 0.6 1
DNA (μL) 2 μL (~1 μg) 10 μL (~0.2 μg) 10 μL (~5 μg)
AarⅠ 1 μL 1 μL 5 μL
ToTal Volume: 20 μL 30 μL 50 μL

*本体系是已纯化的PCR产物。未纯化的PCR产物,10× AgileCut® Buffer 使用量可减少至2 μL。

推荐反应条件:37℃反应1h(根据实验需要,反应时间可以延长至16h)


说明:
(1) 酶切需要两个或两个以上识别位点,反应加入AarI Enhancer可以显著提高酶切效率。

(2) 双酶切或多酶切可以参考“推荐反应体系”加入两种或多种限制性内切酶,要求所有限制酶总体积不超过反应总体积1/10,否则容易产生星号活性或抑制酶切反应。

(3) 孵育16h未表现星号活性,更长时间酶切可能出现星号活性。

 

不同反应缓冲液中的活性

反应缓冲液

AgileCut®

Buffer

Cut Buffer

1.0

Cut Buffer

2.0

Cut Buffer

3.0

Thermo Scientific

FastDigest

NEB

CutSmartTM

活性 100% 10% 100% 10% <10% 100%

 

甲基化影响

dam dcm CpG
无影响 无影响 序列重叠时活性减弱

 

热灭活条件

65℃、20 min

 

FAQs

 

说明书 

AarⅠ_manual.pdf (点击下载)