AfeI 限制酶, # R731
现价：
¥
252.00
识别序列：
5'...AGC↓GCT...3'
3'...TCG↑CGA...5'
5'...AGC↓GCT...3'
3'...TCG↑CGA...5'
产品说明
AfeⅠ
识别序列：
5'...AGC↓GCT...3'
3'...TCG↑CGA...5'
产品组分
| 组分 | R731S | R731M | R731L |
| AfeⅠ (10 U/μL) | 20 μL*1 | 40 μL*1 | 200 μL*1 |
| 10X AgileCut® Buffer | 1.25 mL*1 | 1.25 mL*1 | 1.25 mL*1 |
| 10X DNA Loading Buffer | 1.25 mL*1 | 1.25 mL*1 | 1.25 mL*1 |
储存条件
-20℃保存。
推荐反应体系
| 试剂 | 质粒DNA | PCR产物 | 基因组DNA |
| ddH2O, nuclease-free (#P411) | 15 μL | 16 μL | 30 μL |
| 10× AgileCut® Buffer | 2 μL | 3 μL* | 5 μL |
| DNA (μL) | 2 μL (~1 μg) | 10 μL (~0.2 μg) | 10 μL (~5 μg) |
| AfeⅠ | 1 μL | 1 μL | 5 μL |
| ToTal Volume: | 20 μL | 30 μL | 50 μL |
*本体系是已纯化的PCR产物。未纯化的PCR产物，10× AgileCut® Buffer 使用量可减少至2 μL。
推荐反应条件：37℃反应1h（根据实验需要，反应时间可以延长至16h）
说明：
(1) 双酶切或多酶切可以参考“推荐反应体系”加入两种或多种限制性内切酶，要求所有限制酶总体积不超过反应总体积1/10，否则容易产生星号活性或抑制酶切反应。
(2) 孵育16h未表现星号活性，更长时间酶切可能出现星号活性。
不同反应缓冲液中的活性
| 反应缓冲液 |
AgileCut® Buffer |
Cut Buffer 1.0 |
Cut Buffer 2.0 |
Cut Buffer 3.0 |
Thermo Scientific FastDigest |
NEB CutSmartTM |
| 活性 | 100% | 25% | 100% | 25% | 100% | 100% |
甲基化影响
| dam | dcm | CpG |
| 无影响 | 无影响 | 酶切受阻 |
热灭活条件
65℃、20 min
FAQs
说明书
