Ts Alkaline Phosphatase (M902)
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Ts Alkaline Phosphatase (1 U/μL)
移除DNA和RNA的5′和3′端磷酸基团
移除DNA和RNA的5′和3′端磷酸基团
- 货号/规格
产品说明
Ts Alkaline Phosphatase是一种来源于细菌的温度敏感型(Temperature Sensitive)碱性磷酸酶,能够移除DNA和RNA的5′和3′端磷酸基团,常用于克隆载体去磷酸化,防止克隆时线性化载体自连环化,也可以用于PCR产物中的dNTP去磷酸化,使PCR产物更适合做Sanger测序或SNP分析。75℃孵育5min即可使该酶失活。
产品组分
组分 | M902S | M902M | M902L |
Ts Alkaline Phosphatase (1 U/μL) | 500 μL*1 | 1 mL*1 | 1 mL*5 |
10X TsAP Buffer | 1.5 mL*1 | 1.5 mL*2 | 1.5 mL*10 |
储存条件
-20 ℃保存。
应用
(1)消除DNA和RNA的5′和3′端磷酸基团;
(2)消除克隆载体的磷酸基团,避免克隆时载体自连环化;;
(3)PCR产物Sanger测序或SNP分析前消除PCR产物中的dNTP;
注意事项
(1)Ts Alkaline Phosphatase在所有限制性内切酶反应Buffer中都有活性,可以在酶切的同时加入本品进行去磷酸化;
(2)热失活:75℃孵育5 min,不可逆失活,热失活后,无需纯化产物,可直接用于后续连接反应;
(3)抑制剂:金属螯合剂,例如终浓度50mM EDTA能够完全终止反应;
(4)反应最佳时间和酶用量需要根据不同的反应底物进行实验确定;
(5)本品和DNA结合可能导致电泳条带迁移,可以在DNA Loading Buffer中加入SDS,样品上样前先65℃孵育10 min再冰浴2 min,然后进行琼脂糖凝胶电泳;
FAQs
说明书