Vigart Ultra-Fidelity DNA Polymerase（P273）
高保真DNA聚合酶
- 货号/规格
产品说明
Vigart Ultra-Fidelity DNA Polymerase是一种高保真DNA聚合酶。产品中添加了独特的延伸因子，同时，反应体系也得到了深度优化，使其在扩增能力、保真度等方面都有明显提升。使用lacI法（Cline et al. , Nucleic Acids Research. 1996; 24(18):3546-3551）测定Vigart Ultra-Fidelity DNA Polymerase保真性大概是Taq DNA聚合酶的50倍、野生型pfu DNA聚合酶的6倍。
本产品提供5X Vigart PCR Buffer和2X Vigart GC Buffer两种反应缓冲液，Vigart Ultra-Fidelity DNA Polymerase在5X Vigart PCR Buffer中的保真性是2X Vigart GC Buffer的2倍，因此，5X Vigart PCR Buffer应该是实验过程中的首选Buffer，但是2X Vigart GC Buffer能够显著提高长片段扩增子、高GC含量以及含有复杂结构模板的扩增能力，尤其对高GC含量的模板有极佳的扩增表现。扩增产物为平末端，能够直接用于平末端克隆，推荐使用本公司生产的pAgile-Blunt Cloning Kit（货号：C141）。
产品组分
| 组分 | P273S | P273M | P2739L |
| Vigart Ultra-Fidelity DNA Polymerase (1 U/μL) | 100 μL*1 | 500 μL*1 | 1 mL*1 |
| 5X Vigart PCR Buffer | 1.25 mL*1 | 1.25 mL*5 | 1.25 mL*10 |
| 2X Vigart GC Buffer | 1.25 mL*1 | 1.25 mL*5 | 1.25 mL*10 |
| dNTP Mix (10 mM each) | 100 μL*1 | 500 μL*1 | 1 mL*1 |
| 10X DNA Loading Buffer | 1.25 mL*1 | 1.25 mL*3 | 1.25 mL*5 |
储存条件
-20℃保存。
FAQs
Q1：无扩增产物或产物量少
A1：（1）模板质量
检查模板是否降解，提高模板纯度
（2）模板使用量
参考说明书使用适量的模板DNA
（3）引物浓度
在0.2-0.5 μM范围内调整引物终浓度
（4）退火温度
以2 ℃为梯度降低温度，寻找合适的退火温度
（5）扩增循环数
循环数增加到35-40个循环
（6）延伸时间
适当增加延伸时间至30-60 s/kb
（7）酶使用量
适当提高酶使用量
Q2：有非特异性条带或弥散条带
A2：（1）模板质量
检查模板是否降解，使用高质量模板
（2）模板使用量
参考说明书调整模板使用量
（3）引物浓度
在0.15-0.2 μM范围内调整引物终浓度
（4）退火温度
以2 ℃为梯度提高温度，寻找合适的退火温度
（5）扩增循环数
循环数减少到25-30个循环
（6）延伸时间
如果杂带大于目的条带可以适当减少延伸时间
（7）酶使用量
减少酶量至1.25 U/50 μL反应体系
说明书
Vigart Ultra-Fidelity DNA Polymerase_manual.pdf (点击下载)
