2X Mighty pfu PCR Mix (P275)

产品说明

     Mighty pfu DNA Polymerase是一种高保真DNA聚合酶，由经典的pfu DNA聚合酶经过基因工程改造获得。改造后的Mighty pfu DNA Polymerase具有更强的3′→5′外切酶活性、极高的扩增效率，因此具有更好的校正功能、广泛的模板适应性，扩增速度可以达到15-30s/kb。

       本产品包含Mighty pfu DNA Polymerase、dNTP、PCR Enhancer以及优化的缓冲体系，只需加入引物和模板即可进行PCR扩增，简化了实验操作，提高了实验效率。体系中加入的蛋白稳定剂使得  2× Mighty pfu PCR Mix经过反复冻融后仍可保持稳定的活性，扩增产物为平末端，能够直接用于平末端克隆，推荐使用本公司生产的pAgile-Blunt Cloning Kit（货号：C141）。

产品组分

储存条件
-20℃保存。
 

FAQs

Q1：无扩增产物或产物量少

A1：（1）模板质量

            检查模板是否降解，提高模板纯度

         （2）模板使用量

            参考说明书使用适量的模板DNA

         （3）引物浓度

            在0.2-0.5 μM范围内调整引物终浓度

         （4）退火温度

           以2 ℃为梯度降低温度，寻找合适的退火温度

         （5）扩增循环数

           循环数增加到35-40个循环

         （6）延伸时间

           适当增加延伸时间至30-60 s/kb

Q2：有非特异性条带或弥散条带

A2：（1）模板质量

           检查模板是否降解，使用高质量模板

         （2）模板使用量

           参考说明书调整模板使用量

         （3）引物浓度

           在0.15-0.2 μM范围内调整引物终浓度

         （4）退火温度

           以2 ℃为梯度提高温度，寻找合适的退火温度

         （5）扩增循环数

           循环数减少到25-30个循环

         （6）延伸时间

           如果杂带大于目的条带可以适当减少延伸时间

Q3：扩增产物如何加A尾
A3：按照下表配置反应体系

说明书

2X Mighty pfu PCR Mix_manual.pdf (点击下载)